脂肪酸合成酶(FAS)測(cè)試盒操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。000~2000g 離心 min,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
英諾克李斯特氏菌
紅曲霉
不動(dòng)桿菌
食酸菌
短波單胞菌
多頭霉
掘氏疫霉
煙草疫霉
副球菌
溶藻細(xì)菌
假單胞菌
芽孢桿菌
大腸桿菌
酸土脂環(huán)芽孢桿菌
馬紅球菌
巧克力微桿菌
粘質(zhì)沙雷氏菌粘質(zhì)亞種
紅串紅球菌
乳酸乳球菌乳酸亞種
腸膜明串珠葡萄聚糖亞種
青枯假單胞菌
食神鞘氨醇桿菌
生孢梭菌
發(fā)根根瘤菌
粉紅單端孢霉
皺褶青霉
里氏木霉
梨形毛霉
粉紅寄生菌
短密青霉
黃曲霉
米黑根毛霉
三線鐮孢菌
指狀青霉
意大利青霉
黑曲霉
米曲霉
不動(dòng)桿菌
食酸菌
短波單胞菌
多頭霉
掘氏疫霉
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