對熒光素酶檢測試劑盒的知識點不要不懂裝懂
瀏覽次數(shù):640發(fā)布日期:2020-12-03
熒光素酶檢測試劑盒使用為基因表達的定量研究提供了一種方便、快捷、靈敏的方法。利用轉(zhuǎn)錄調(diào)控和熒光素酶報告基因耦聯(lián)表達,常被用于研究培養(yǎng)細胞的多種生物學(xué)特性。熒光素酶是理想的報告基因,因為哺乳動物細胞中不含內(nèi)源性熒光素酶,一旦轉(zhuǎn)錄完成立即生成功能性的熒光素酶。
熒光素酶檢測試劑盒產(chǎn)品特點:
*裂解能力更強:能夠*裂解絕大部分種類細胞。
*信號更強:能夠準確檢測弱啟動子的表達。
*靈敏度更高:可檢測低至10‐20摩爾熒光素酶分子。
*線性范圍更廣:線性檢測范圍超過酶濃度的8個數(shù)量級。
熒光素酶檢測試劑盒注意事項:
1、樣品和測定試劑混合后到測定前的時間應(yīng)盡量控制在相同時間內(nèi),例如30秒內(nèi)。
2、測定時樣品和試劑均需達到室溫后再進行測定,以減少溫度對酶反應(yīng)有影響。
3、建議適當分裝后避光保存,避免反復(fù)凍融和長時間暴露于室溫。三次以內(nèi)的凍融對測定結(jié)果無明顯影響。
4、樣品和測定試劑混合后,必須等待1-2秒,再進行測定。測定時間通常為10秒,根據(jù)情況也可以測定更長或更短時間,但是同一批樣品較好使用相同的測定時間。
熒光素酶檢測試劑盒基于兩個發(fā)光報告基因分析系統(tǒng)來定量檢測基因表達。兩個不同的熒光素酶,螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶,在細胞中同時表達,從而在同一樣品中實現(xiàn)有效的雙報告分析。
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