細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛應(yīng)用的學科領(lǐng)域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等; 適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
產(chǎn)品描述:公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細胞密度。公司提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務(wù)標準。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | 人肺大靜脈內(nèi)皮細胞 |
英文名稱 | HumanLung:PulmonaryVeinEndothelialCells |
貨號 | CS-X3267 |
培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
?以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品:
9.375pg/ml大鼠卵清蛋白特性IgE(OVA sIgE)ELISA試盒pTH-Related Protein (1-34) amide (human, mouse, rat)
0.094ng/ml大鼠骨保護素(OPG)ELISA試盒(Ile5,Trp23,Tyr36)-pTH-Related Protein (1-36) (human, mous
0.375ng/ml大鼠骨保護素配體(OPGL)ELISA試盒(Tyr36)-pTH-Related Protein (1-36) (human, mouse, rat)
0.094ng/ml大鼠骨橋素(OPN)ELISA試盒(Tyr36)-pTH-Related Protein (1-36) amide (chicken)
18.75pg/ml大鼠骨粘連蛋白(ON)ELISA試盒pTH-Related Protein (1-37) (human, mouse, rat)
0.094ng/ml大鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA試盒Suc-ALPF-OH
0.094ng/ml大鼠骨鈣素/骨谷氨蛋白(OT/BGP)ELISA試盒Suc-ALPF -AMC
0.938ng/ml大鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA試盒Suc-ALPF-pNA
0.938ng/ml大鼠阿立新A(Orexin A)ELISA試盒Suc-AFPF-pNA
0.188ng/ml大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA試盒H-D-ALK-AMC
人肺大靜脈內(nèi)皮細胞軟骨粘附素(CHAD)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)脫硝苯地平-d6
帶蛋白(CGN)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)羥基脫硝苯地平羧鹽
神經(jīng)酰胺激酶(CERK)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)尼莫地平-d7
Calicin蛋白(CCIN)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)奧洛他定N氧化物
景天庚糖激酶(SHPK)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)奧洛他定鹽鹽-d6
鈣網(wǎng)蛋白3(CALR3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)外消旋去基奧昔布寧鹽鹽
癌抗原1(CAGE1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)奧昔布寧N氧化物
脊柱后側(cè)凸肽酶(KY)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(R)-N-去基奧昔布寧鹽鹽
L-2-羥戊二脫酶(L2HGDH)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)α-去環(huán)己基-α-苯基奧昔布寧
排卵蛋白(LAYN)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(S)-N-去基鹽奧昔布寧
心脂?;D(zhuǎn)移酶1(LCLAT1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(S)-鹽奧昔布寧
乳糖酶(LCT)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)脫氟帕羅西汀鹽鹽
芳酰胺去?;?AADAC)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)帕羅西汀馬來鹽
生物素酰胺酶(BTD)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(3S-反式)-5-[[4-(4-氟苯基)-3-哌啶基]氧基]-2-氧基苯酚(帕羅西汀代謝產(chǎn)物)
巴特蛋白(BART)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)(-)-反式-4-[4-(4'-氟苯基)-3-哌啶基基]-2-氧基苯酚(帕羅西汀代謝產(chǎn)物)
細胞分類:
一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
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